2.3 铁皮石斛多糖对HUVEC细胞基因表达谱的影响

    2.3.1 HUVEC细胞总RNA的提取 取对数生长期的HUVEC细胞，用ECM培养基重悬后，按6×105个/孔接种于6孔板中，培养过夜，待细胞贴壁后，将细胞随机分为对照组和铁皮石斛多糖组(400 ?g/mL，剂量设置参考“2.2”项下IC30值)，每组设置3个复孔。对照组加入PBS 8 ?L，给药组加入“2.1”项下多糖贮备液8 ?L(各组总体积均为1 mL)，培养24 h。收集细胞，使用Trizol RNA抽提试剂盒并按照其说明书提取各组细胞的总RNA，使用超微量分光光度计分别于230、260、280 nm处检测各孔的A值(其中，A260 nm与核酸浓度相关，A280 nm与蛋白质或氨基酸浓度相关，A230 nm与碳水化合物浓度相关)，计算RNA的浓度(RNA浓度与A260 nm/A280 nm呈正比)。

    2.3.2 探针标记、芯片杂交与图像采集、分析 取“2.3.1”项下各组细胞RNA适量，按照逆转录合成cDNA试剂盒说明书进行扩增、转录后 ......